Kromatografi
Kromatografi är en metod som använder blandade ämnen som beror på hur snabbt de rör sig genom särskilda medier eller kemiska ämnen. Den består av en stationär fas (ett fast ämne) och en rörlig fas (en vätska eller en gas). Den mobila fasen strömmar genom den stationära fasen. Kromatografi används mycket inom biokemi och analytisk kemi.
Kromatografi i platt plan
Den stationära fasen är en plan yta, t.ex. papper, eller ett ämne på glas.
Papperskromatografi
Papperskromatografi är en teknik för att separera och identifiera blandningar som är (eller kan vara) färgade. Den har till stor del ersatts av tunnskiktskromatografi, men är fortfarande ett kraftfullt undervisningsverktyg. Dubbelvägskromatografi på papper, även kallad "tvådimensionell kromatografi", använder två lösningsmedel och roterar pappret 90° däremellan. Den är användbar för att separera komplexa blandningar av föreningar med liknande polaritet, t.ex. aminosyror. De föreningar som används inledningsvis garanterar att du vet om färgen är ren (endast ett ämne) eller om det rör sig om en blandning (flera ämnen).
Tunnskiktskromatografi
Tunnskiktskromatografi (TLCC) är en vanlig laboratorieteknik som liknar papperskromatografi. I stället för en stationär fas av papper används ett tunt lager av adsorbent som kiselgel, aluminiumoxid eller cellulosa på ett plant substrat. Jämfört med papper har den fördelen av snabbare körningar, bättre separationer och möjlighet att välja mellan olika adsorbenter. För ännu bättre upplösning och för att möjliggöra kvantifiering kan högpresterande TLC användas.
Kromatografisk burk
Kolonnkromatografi
Kolonnkromatografi separerar föreningar med hjälp av många kemiska åtgärder mellan kemikalien som testas och kromatografikolonnen (en stav med en blandning av speciella kemikalier). Kolonnen drivs antingen med hjälp av gravitation eller en pump.
Den blandade substans som ska testas tillsätts i en liten mängd och bromsas genom viss kemisk eller fysisk aktivitet med kemikalierna i kromatografikolonnen. Hur långsam den är beror på typen av kemikalier i det ämne som ska testas och på de olika faserna. Den tid vid vilken en viss kemikalie eluerar (kommer ut ur kolonnens ände) kallas "retentionstid" och man tror att det bara finns en för en kemikalie.
Den vanligaste stationära fasen för kolonnkromatografi är kiselgel, följt av aluminiumoxid. Cellulosapulver har använts tidigare. Den rörliga fasen är antingen ett rent lösningsmedel eller en blandning av lösningsmedel. Den väljs så att tiden och mängden lösningsmedel som används är så liten som möjligt, samtidigt som de kemikalier som testas tydligt separeras.
Resultat av högpresterande vätskekromatografi
HPLC
Högpresterande vätskekromatografi (HPLC) kallas ibland även högtrycksvätskekromatografi. Det är kolonnkromatografi som körs under tryck för att öka processens hastighet.
Vanliga lösningsmedel som används i HPLC är blandningar av vatten eller olika organiska vätskor (de vanligaste är metanol, etanol eller acetonitril).
Frågor och svar
F: Vad är kromatografi?
S: Kromatografi är en process för att separera komponenterna i en blandning baserat på deras rörelsehastighet genom specifika medier.
F: Vilka faktorer avgör resultatet av kromatografi?
S: Resultatet av kromatografin beror på den hastighet med vilken de blandade ämnena rör sig genom de särskilda medierna eller kemiska ämnena.
F: Vilka är de två faser som ingår i kromatografi?
S: Kromatografi består av en stationär fas (fast ämne) och en mobil fas (vätska eller gas).
F: Hur rör sig den mobila fasen genom den stationära fasen vid kromatografi?
S: Den mobila fasen flödar genom den stationära fasen.
F: Vilka är de viktigaste områdena där kromatografi används?
S: Kromatografi används i stor utsträckning inom biokemi och analytisk kemi.
F: Vad är den stationära fasen i kromatografi?
S: Den stationära fasen i kromatografi är en fast substans som interagerar med blandningens komponenter och får dem att sakta ner eller sluta röra sig.
F: Vad är den mobila fasen i kromatografi?
S: Den mobila fasen i kromatografi är en vätska eller gas som strömmar genom den stationära fasen och bär med sig komponenterna i blandningen med olika hastigheter.
