Tunnskiktskromatografi
Tunnskiktskromatografi (eller TLC) är en metod genom vilken blandningar separeras i sina enskilda beståndsdelar.
TLC utförs på en TLC-platta. Dessa plattor består av ett skikt av kiseldioxid och har vanligtvis ett tunt glas som underlag, även om andra material, t.ex. plast, kan användas. Silikabeläggningen på TLC-plattans framsida kallas den stationära fasen.
TLC-analys
Ett TLC-experiment börjar med att placera en liten droppe av flytande analyten nära botten av TLC-plattan. Detta kallas "spotting" av TLC-plattan. Mycket tunna glasrör används vanligen som spotters.
När en platta har prickats placeras den i en glasbehållare med en liten mängd lösningsmedel. Lösningsmedlet kallas den rörliga fasen. Det är viktigt att lösningsmedlets höjd är lägre än den höjd som föreningen prickades på plattan. När lösningsmedlet rör sig uppåt på TLC-plattan genom kapillärverkan kommer även föreningen att röra sig. Föreningen kommer att separeras i sina beståndsdelar baserat på varje beståndsdels dragningskraft till den stationära fasen jämfört med den rörliga fasen. Komponenter som dras till den mobila fasen mer än de dras till den stationära fasen kommer att röra sig längre upp i kolonnen. Attraktionskrafterna är baserade på polaritetsskillnader.
TLC-plattan bör avlägsnas innan lösningsmedlet når plattans överkant. Separerade föreningar kommer ibland att färgas, men det krävs ofta ytterligare arbete för analys. Många föreningar kommer att lysa upp när TLC-plattan placeras under en ultraviolett lampa. Det är också vanligt att TLC-plattor doppas i färgämnen (t.ex. anisaldehyd, kaliumpermanganat eller jod) för att tvinga en förening att synas på plattan.
Ansökan
TLC används ofta av organiska kemister för att övervaka hur reaktioner fortskrider. Förekomsten av utgångsmaterial och produkter kan övervakas med hjälp av en enda TLC-platta.
Baserat på resultaten av ett TLC-experiment kan en större volym av blandningen separeras med en annan teknik (t.ex. kolonnkromatografi) med ett liknande lösningsmedelssystem. Eller så kan ett TLC-experiment upprepas med ett annat lösningsmedel. Blandningar av lösningsmedel kan också användas. Användningen av olika lösningsmedel kommer att påverka hur väl enskilda komponenter separeras på TLC-plattan.
